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UTILISATION DE LA RT-PCR EN TEMPS REEL IBD

EDITIONS NOTRE SAVOIR
04 / 2025
9786203897173
Francés

Sinopsis

Le virus de la fièvre aphteuse (FMDV) est diagnostiqué par un test d?isolement du virus combiné à un test ELISA de l?antigène et, depuis peu, par une RT-PCR en une seule étape. L?utilisation de la RT-PCR fluorogénique prend de plus en plus d?importance pour la détection rapide du virus de la fièvre aphteuse à partir d?échantillons cliniques qui ne peuvent pas être traités par des tests d?isolement du virus et des tests ELISA de l?antigène. La RT-PCR quantitative en temps réel (qRT-PCR) combine la transcription inverse avec l?amplification par PCR et la détection de l?amplification positive à l?aide de sondes fluorescentes telles que la sonde TaqMan «. Dans la présente étude, une qRT-PCR basée sur la sonde TaqMan« a été standardisée et utilisée pour la détection du génome de la fièvre aphteuse à partir d?échantillons cliniques comprenant des sécrétions nasales, du plasma et des fluides oesophago-pharyngés (échantillons probang). La standardisation initiale a été réalisée en utilisant différentes dilutions en série d?un isolat du virus de la fièvre aphteuse OTNN 24/84 (106,8 DICT50) et 102 virus ont pu être identifiés à l?aide de la TaqMan« qRT-PCR. Des standards d?ARN ont été synthétisés in vitro à partir d?un plasmide contenant 110 paires de bases de la région 3D d?un isolat du virus de la fièvre aphteuse de type O. L?ARN a été dilué dix fois en série et utilisé comme ARN standard pour générer des courbes standard.

PVP
64,30