Portada

UTILIZAÇÃO DA RT-PCR EM TEMPO REAL IBD

EDIÇOES NOSSO CONHECIMENTO
04 / 2025
9786203897197
Portugués

Sinopsis

O vírus da febre aftosa (VFA) é diagnosticado através de um teste de isolamento do vírus combinado com um teste ELISA de antigénio e, recentemente, com um RT-PCR de um passo. A utilizaçao de RT-PCR fluorogénica está a ganhar cada vez mais importância para a deteçao rápida do vírus da febre aftosa a partir de amostras clínicas que nao podem ser processadas por testes regulares de isolamento do vírus e por ELISA de antigénio. A RT-PCR quantitativa em tempo real (qRT-PCR) combina a transcriçao inversa com a amplificaçao por PCR e a deteçao de amplificaçao positiva utilizando sondas fluorescentes como a sonda TaqMan «. No presente estudo, a qRT-PCR baseada na sonda TaqMan« foi padronizada e utilizada para a deteçao do genoma do vírus da febre aftosa a partir de amostras clínicas, incluindo secreçoes nasais, plasma e fluidos esófago-faríngeos (amostras probang). A padronizaçao inicial foi efectuada utilizando diferentes diluiçoes em série de um isolado de vírus da febre aftosa OTNN 24/84 (106,8 TCID50) e 102 vírus puderam ser identificados utilizando o TaqMan« qRT-PCR. Os padroes de ARN foram sintetizados in vitro a partir de um plasmídeo que contém 110 pares de bases da regiao 3D de um isolado de FMDV de tipo O. Foi efectuada uma diluiçao em série de dez vezes do ARN e utilizada como ARN padrao para gerar curvas padrao.

PVP
64,30